百檢網(wǎng)第三方機(jī)構(gòu)檢測范圍廣泛,輕工行業(yè)相關(guān)產(chǎn)品檢測服務(wù)經(jīng)驗(yàn)豐富,全國眾多合作實(shí)驗(yàn)室,資質(zhì)齊全,可根據(jù)QB 2525—2001 食品添加劑葡萄糖轉(zhuǎn)苷酶安排寄樣檢測服務(wù)。QB 2525—2001 食品添加劑葡萄糖轉(zhuǎn)苷酶部分相關(guān)內(nèi)容如下。
QB 2525—2001.
f)5%苯酚溶液:將苯酚(CH,OH) 5g于60℃溶于50 mL水,將溶液冷卻至室溫,用水稀釋至100 mL;
g)4-氨基安替比林-苯酚顯色劑:在 Tris-磷酸緩沖液(pH7.2)40 mL中,加入葡萄糖氧化酶(5 mg 葡萄糖氧化酶“Amano”2)550單位和過氧化物酶(0.76 mg,16$ U/mg的過氧化物酶“Amano”2) 125單位,再加入0.4%4-氨基安替比林溶液1 mL和5%苯酚溶液1.4 mL,用Tris-磷酸緩沖液(pH7.2)稀釋至50 mL(隨配隨用);
h)底物溶液:將α-甲基葡萄糖(CH,0;)2.0g溶解于水50 mL中,用水稀釋至100mL<5℃~15℃可穩(wěn)定二星期)。
4.1.3測定方法
`4.1.3.1 樣品溶液的制備
用酶制劑配制酶溶液使其0.5 mL的Ao-A介于0.15和0.32之間:吸取酶制劑1 mL,加到一個適當(dāng)大小的容量瓶中,用經(jīng)冷卻的水稀釋至刻度,混勻。
示例:α-葡萄糖轉(zhuǎn)苷酶L“Amano":[n-300〕稀釋1 mL--300 mL。
4.1.3.2測定
吸取底物溶液(4.1.2h)1mL和0.02 molL乙酸-乙酸鈉緩沖液(pH5.0)(4.1.2c)1mL`加入試管(15 mm× 150 mm)內(nèi),在(40±0.5)℃的恒溫水浴箱中保溫10 min。加入樣品稀釋酶液(4.1.3.1)0. 5 mL,混勻,于(40士0.5)℃的恒溫水浴箱中準(zhǔn)確保溫60 min后,將試管轉(zhuǎn)移至沸水浴中加熱 5 min,然后用流水快速冷卻。冷卻后,吸此溶液0.1 mL到試管中,并加入4-氨基安替比林-苯酚顯色劑(4.1.2g) 3 mL,混勻.將此試管放入(40土0.5)℃的恒溫水浴中,保溫20 min,測定500 nm處的吸光度Aso。
空白對照:吸0.02 molL乙酸-乙酸鈉緩沖液(pH5.0)(4.1.2c) 1 mL和樣品稀釋酶液(4.1.3.1)0.5mL加入試管(15mm× 150mm)內(nèi),混勻。將試管轉(zhuǎn)移至沸水浴中加熱5min,然后用流水快速冷卻。冷卻后,加入底物溶液(4.1.2h) 1 mL,混勻。吸此溶液0.1 mL至空試管(15 mm× 150 mm)內(nèi),加入4-氨基安替比林-苯酚顯色劑(4.1.2 g) 3 mL,混勻。將此試管放入《40士0.5)℃的恒溫水浴中,保溫20min,測定500nm處的吸光度A。
*稱取105℃下干燥6h的葡萄糖(CH,0) 1.000g,溶于100mL水中,分別取1mL,2mL,3mL,4mL,5mL,用水定容至100mL(每1mL該溶液分別含有100 pg , 200 ug,300 ug . 400 ug和500 ug的葡萄糖)。
分別吸取以上葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液0.1 mL和4-氨基安替比林-苯酚顯色劑(4.1.2g) 3 mL,加入試管(15 mm×150 mm)內(nèi),混勻。將這些試管放入(40士0.5)℃的館溫水浴箱中,保溫20mnin,測定波長500 nm處的吸光度AsosAs2o,As3AssoAsso。
·標(biāo)準(zhǔn)液的空白對照:用水來替代葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液,按上述方法測定空白對照液吸光度Aso。
4.1.4 分析結(jié)果的表述
在此試驗(yàn)條件下,在反應(yīng)混合物2.5 mL 中,60min產(chǎn)生1 ug葡萄糖所需的酶量定義為一-個α-葡萄糖轉(zhuǎn)苷酶活力單位。
(QB 2525—2001 食品添加劑葡萄糖轉(zhuǎn)苷酶標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容僅部分展示)
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